| 초록 |
연구의 목적 및 내용 난검출성 대장암 및 대장용종 조기검출이 가능한 고민감성 펩타이드기반의 분자결합자(molecular binder)를 발굴 및 개량하고, 최소 2종 이상, 수십 nM-pM 수준의 바이오마커 단백질 검출이 가능한 펩토머 분자설계 및 합성을 통해서 암조기진단 유효성 평가를 위한 생체진단용 펩토머 분자인식자를 개발하고자 함 연구결과 ○1차년도: - 3종의 타킷단백질을 확보를 통해 선정하고, 2) M13 peptide library를 이용하여 3종의 타킷 바이오마커 단백질을 사용하여 biopanning과정을 거쳐 고결합력과 고인지능을 갖춘 신규의 펩타이드 프로브를 발굴 - PS-SPCL기법을 이용한 펩타이드 발굴/설계기술의 본 과제 펩토머개발에 적용을 위한 Proof-of-concept연구 ○2차년도: - PEP-FOLD를 활용한 펩타이드기반 분자인식자의 분자설계 및 합성 - Magnetic beads를 통한 biopanning과정을 거쳐 M13 phage display를 이용하여 AHSG 단백질에만 특이적 결합을 하는 신규 펩타이드 프로브의 발굴 - 신규 펩타이드 인식자 발굴 AHSG-R4#1(QVNGLGERSQQM),AHSG-R4#8(HAMSPVFLSKYA),AHSG-R4#13(HFGETGKQPNGN), AHSG-R4#18(MHHRQPSTGAAA) - M13 phage display를 통해 선별된 파지들의 효소면역측정법 (ELISA)을 통한 결합력 측정 - 신규 발굴된 4종류의 펩타이드 인식자를 ELISA assay방법을 통해 타겟단백질에 대한 고결합력과 인지능을 포함하는 AHSG-R4#8의 결합력 측정과 검증 ○3차년도: - CV, EIS를 이용하여 LRG1에 특이적인 결합을 하는 신규 펩타이드 분자인식자 4종에 대한 결합능 측정 및 검증 - 전기화학적 검출방법과 순수한 재조합 LRG1 단백질을 이용한 분자인식자의 결합력, 특이성, 감도 및 성능평가 - 실제 대장암 및 대장용종 환자샘플을 대상으로 최종후보군의 분자인식자의 결합력 측정 및 성능평가를 통한 기능성 검증 연구결과의 활용계획 신속․정확하게 난검출성 대장암 및 대장용종 조기진단과 분석이 가능한 다중성 바이오센서칩 개발이 가능하게 될 것으로 기대되며, 향후 응용화가 이루어질 경우 국내외 파급효과 클 것으로 기대함. 또한, 본 연구과제수행으로 도출될 기술은 효소, 핵산, 항체, 고가의 영상장치 등을 이용한 기존의 분석법과 비교하여 본 연구결과로 비용절감효과가 있고 신속성 및 동시 검출능력이 향상된 유비퀴터스형의 소형화/자동화 상품의 개발가능성이 높음 (출처 : 요약문 4p) |
