대장균 표면발현 항체-라이브러리를 이용한 의료진단용 모노크로날 항체개발
기관명 | NDSL |
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보고서유형 | report |
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발행년월 | 2020-03-01 |
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주관연구기관 | 연세대학교 |
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내용 | |
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초록 | 연구개요 ○ 본 연구개발에서는 단백질공학기술인 대장균 표면발현 기술을 이용하여 고감도 모노크로날 항체의 합성 및 의료진단 응용기술을 개발하고자 함. 최종적으로는 AIDS의 바이오 마커인 NEF에 대한 모노크로날 항체를 스크리닝하여 고감도 임뮤노어세이 및 비표지형 캐패시티브 바이오센서에 적용하고자 함. [목표 1] 높은 표면발현 밀도(>10 5 /E. coli) 와 항체다양성(>10 7 cfu)을 갖는 항체라이브러리 구현 [목표 2] 항체 라이브러리로부터 3일 이내 모노클로날 항체를 확보하는 분리 공정을 구현 [목표 3] 높은 친화도(K d -9 M)를 갖는 트윈체인 항체라이브러리를 구현 [목표 4] 타겟항체를 표면발현한 대장균 외막을 코팅하여 고감도 임뮤노어세이 및 비표지형식의 캐패시티브 바이오센서에 응용 연구 목표대비 연구결과 [목표 1] 높은 표면발현 밀도(>10 5 /E. coli) 와 항체다양성(>10 7 cfu)을 갖는 항체라이브러리 구현 - 단일체인 항체-라이브러리(scFv)를 개발하여 목표 표면발현 밀도 (1.10 x 10 5 molecules/E. coli )와 목표 다양성 (1.60 x 10 7 cfu)을 획득함. - 트윈체인 항체-라이브러리(tcFv)를 개발하여 목표 표면발현 밀도 (1.01 x 10 5 molecules/E. coli)와 목표 다양성 (1.24 x 10 7 cfu)을 획득함. [목표 2] 항체 라이브러리로부터 3일 이내 모노클로날 항체를 확보하는 분리 공정을 구현 - 3일이내 항체-합성공정을 개발하여 FACS 기반 항체 분리 공정으로 EPO 항원에 대한 항체를 3일 내에 스크리닝 및 분리를 시연함. [목표 3] 높은 친화도(K d -9 M)를 갖는 트윈체인 항체라이브러리를 구현 - 트윈체인 항체 라이브러리에서 분리한 EPO에 대한 항체를 분석하여 높은 친화도를 갖는 항체 (K d = 8.5 x 10 -9 )가 분리됨을 확인함. [목표 4] 타겟항체를 표면발현한 대장균 외막을 코팅하여 고감도 임뮤노어세이 및 비표지형식의 캐패시티브 바이오센서에 응용 - NEF 항원에 대한 항체를 표면발현하여 비표지 방식의 SPR 센서에 응용함. 3.0 nM의 LOD와 3.0~26.7 nM의 측정범위를 갖는 고감도 임뮤노어세이를 구현. 연구개발결과의 중요성 가. 기술적 측면 ∘ 본 연구개발에서 진행하고자 하는 항체라이브러리 표면발현 대장균 및 이를 이용한 임뮤노어세이와 관련된 연구결과는 본 연구팀이 최초로 보고하는 결과임. ∘ 본 연구개발과정을 통해 얻어지는 결과를 통해 20 여 편의 논문게재 및 다수의 학회발표 등의 수준높은 연구성과를 확보함. 나. 경제적·산업적 측면 ∘ 본 연구개발에서 목표하는 캐패시티브 바이오센서 및 표면발현 대장균 외막과 관련된 제반 연구성과는 의료진단 및 환경 모니터링 등 고부가가치 산업과 연결된 임뮤노어세이의 기초원천기술에 해당하므로 학문적인 중요성 이외에도 높은 경제 산업적인 가치를 가지고 있는 것으로 판단됨. 본 연구개발과정을 통해 얻어지는 연구성과에 대해 7 편의 지적재산권을 출원하였고, 후속 연구를 통해 기술의 활용 범위를 늘려나갈 예정임. (출처 : 요약문 2p) |
원문URL | http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=REPORT&cn=TRKO202000004720 |
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