초록 |
본 발명은 써머스 칼도필러스 GK24 (Thermus caldophilus GK24) 유래의 내열성 파이로포스파타제 (pyrophosphatase)에 관한 것으로서, 써머스 칼도필러스 GK24로부터 유래하는 내열성 파이로포스파타제를 코딩하는 유전자 및 그로부터 유추되는 아미노산 서열에 관한 것이다. 본 발명자들은 써머스 써머필러스 HB8 (Thermus thermophilus HB8)의 파이로포스파타제 (이하 'Tth Ppase'라 함)의 유전자를 프로브로 사용하여 써머스 칼도필러스 GK24에서 써머스 칼도필러스 GK24의 파이로포스파타제 (이하 'Tca Ppase'라 함)의 유전자를 클로닝하고, 클로닝된 유전자의 염기서열 및 그로부터 유추되는 아미노산 서열을 결정한 결과, Tca Ppase 유전자는 종지코돈을 포함하여 총 528 bp이며, 175개의 아미노산으로 구성된 단백질을 코딩하는 것으로 확인되었다. 또한 이 Tca Ppase 유전자는 대장균에서 발현시킨 후, 정제하여 특성을 조사하였다. 본 발명의 Tca Ppase는 DNA 씨퀀싱(sequencing)의 효율 증진과 PCR (polymerase chain reaction)에 의한 DNA 증폭 효율을 높이기 위해 내열성 DNA 중합효소와 함께 각종 유전공학연구 및 유전병 진단 등에 유용하게 활용된다. |