| 초록 |
본 발명은 mRNA 인터퍼라제의 독특한 성질을 이용한 살아 있는 대장균(E. coli) 세포에서의 SPP 시스템을 개시하며, 상기 mRNA 인터퍼라제로는 박테리아 독소로서 단일 가닥 RNA- 및 ACA-특이적 엔도리보뉴클레아제인 MazF를 일예로 들 수 있으며, 상기 MazF는 생체 조건(in vivo)에서 효율적으로 그리고 선택적으로 모든 세포 mRNA들을 분해하며, 그 결과 총 단백질 합성을 급격히 감소시킨다.ACA-결핍 mRNA를 엔코딩하도록 유전자조작된 목표 유전자와 MazF의 동시-발현(concomitant expression)은 백그라운드 세포 단백질 합성이 사실상 부재한 상태에서 표적 단백질 발현을 지속적으로 유지시켜 높은 수준으로(90% 까지) 표적 단백질 합성을 유발한다. 놀랍게도, 표적 단백질의 합성은 적어도 4일간 지속되며, 이는 세포가 이들의 성장 지체에도 불구하고 전사 및 번역 능력을 보유하고 있음을 시사하는 것이다.SPP 기술은 효모와 인간 단백질에 매우 적합하며, 심지어 박테리아의 내재성 막 단백질에도 유용하다.상기 신규 시스템은 견줄데 없는 신호 대비 잡음 비율로 인하여 이전부터 생물학적으로 중요하게 여겨졌으나 다루기 어려웠던 단백질들의 구조적 기능적 연구를 매우 간편하게 할 수 있도록 할 수 있다. |
