초록 |
본 발명은 루시페라아제 리포터 유전자를 이용한 푸자리움 속 곰팡이 형질전환용 벡터 및 이를 이용한 곰팡이 독소 검출 방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 푸자리움 속 붉은 곰팡이의 독소를 발현하는 전사인자와 루시페라아제 리포터 유전자를 PCR 융합시켜 제조되는 벡터를 이용하여 형질전환한 형질전환체를 이용하여 푸자리움 속 곰팡이의 독소 생성여부를 루시페라아제 활성도 측정을 통해 분석하는 검출방법에 관한 것이다. 본 발명은 곰팡이 독소인 트라이코쎄신 또는 제랄레논의 경로특이 전자조절인자인 Tri6 또는 ZEB2 유전자 프로모터 부위와 반딧불 루시페라아제 유전자(FLUC)를 single-joint PCR 방법으로 융합하여 제작되는 붉은 곰팡이 형질전환용 벡터 (pPTri6-FLuc-H 벡터 또는 pPZEB2-Fluc-H 벡터)를 제공한다. 또한, 본 발명은 상기 붉은 곰팡이 형질전환용 벡터(pPTri6-FLuc-H 벡터 또는 pPZEB2-Fluc-H 벡터)로 형질전환된 형질전환 세포주(FLTRI6 또는 FLZEB2)를 제공한다. 또한, 본 발명은 상기 형질전환 세포주(FLTRI6 또는 FLZEB2)를 이용하여, 아그마틴 함유 액체 배지 또는 SG 액제 배지에서 균주 배양 후, 루시페라아제 활성을 측정함으로써, 붉은 곰팡이 독소의 생성 여부를 분석하는 방법을 제공한다. |