초록 |
본 발명은 재조합 인간 상피세포 성장인자를 세포밖으로 분비하는 재조합 미생물의 배양액으로부터 흡착법과 역상 고속액체 크로마토그래피를 이용하여 재조합 인간 상피세포 성장인자를 정제하는 방법에 관한 것이다. 본 발명에 의하면, 흡착 공정과 역상 고속액체 크로마토그래피 단 두 공정만으로도 내독소가 낮은 고순도의 재조합 단백질을 고수율로 수득할 수 있고, 흡착 공정만으로도 90% 이상의 순도를 가지는 재조합 단백질을 80% 이상의 수율로 수득할 수 있으므로, 종래 여러 단계의 크로마토그래피를 수행함에 의하여 발생하던 문제점들을 극복하여 대량생산을 매우 용이하게 할 수 있다. 또한, 공정을 수행하는 중에 높은 농도의 염을 사용하지 않으므로, 필요에 따라 여러 가지 크로마토그래피를 유연하게 추가로 사용할 수 있으며, 초기 배양액의 PH를 조정하는 것 외에는 추가적인 PH 적정을 필요로 하지 않기 때문에, 침전을 방지하면서 단백질을 회수할 수 있을 뿐만 아니라, 균주제거와 정제를 동시에 수행할 수 있으므로 재조합 단백질을 보다 신속하고 저렴하며 간편하게 정제할 수 있을 것이다. |