| 초록 |
본 발명은 친화성 크로마토그래피를 통하여 글루타티온-S-전이효소 (GST, glutathione-S-transferase) 융합 단백질을 정제하는 방법에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 (1) GST 융합 단백질 유전자를 함유하는 균주를 배양하는 단계와, (2) 상기 (1) 단계에서 배양된 배양액을 원심분리하여 세포가 용리된 용리액을 얻는 단계와, (3) 상기 (2) 단계의 용리액을 글루타치온(GSH, glutathione) 결합 수지에 적용하여 GSH 친화성 컬럼에 GST 융합 단백질을 결합시키는 단계와, (4) 포름산을 함유하는 용리 완충액으로 GST 융합 단백질을 용리하는 단계, 및 (5) GST 융합 단백질을 회수하는 단계를 포함하는 재조합형 GST 융합 단백질의 정제방법에 관한 것이다. 상기 정제방법에 의하면, GST에 융합된 단백질 고유의 구조적, 기능적 특성에 영향을 미치지 않으면서 고순도의 GST 융합 단백질을 얻을 수 있으며, 용리완충액으로서 GSH를 사용하는 경우에 비하여 비용 면에서 효율적이다. |
