초록 |
본 발명의 한 측면은, 인간 신장 C-DNA 라이브러리로부터 클론되고 인간의 미각 조직을 포함한 다른 조직에서도 발현되는 인간 상피 나트륨 채널 (HENAC)의 프로파일링 및 스크리닝을 위한, 포유류 세포 기반 고처리량 분석법에 관한 것이다. 본 발명은 또한 인간 ENAC 조절제, 바람직하게는 ENAC 증강인자의 동정을 위한, 양서류 난모세포 기반의 중간처리량 전기생리학적 분석법에 관한 것이다. 세포 기반 ENAC 분석법에서 ENAC의 기능을 조절하는 화합물은 인간에 있어서 짠맛에 영향을 미치는 것으로 기대된다. 본원에 기술한 분석법은 기존의 세포 발현 시스템에 대해 장점을 갖는다. 포유류 세포의 경우, 이러한 분석법은 표준 96공 또는 384공 배양판에서 고처리량 방식으로 실시될 수 있는데, ENAC 기능을 억제하는 화합물, 바람직하게는 페나밀과 같은 아밀로라이드 유도체를 사용함으로써 향상된 분석 결과가 얻어진다. 본 발명의 난모세포 전기생리학적 분석법 (이전극 전압고정법)의 경우, 이들 분석법은 인간 ENAC을 특이적으로 조절하는 화합물의 동정을 용이하게 한다. 본 발명의 분석법은 인간 HENAC 기능을 용이하게 하거나 (향상시키거나) 억제하는 화합물을 검출하는 데 유용한 확실한 선별법을 제공한다. 이로써 인간 ENAC 채널 활성을 향상시키거나 차단하는 화합물은 인간에 있어서 짠맛을 조절하게 된다. |