| 초록 |
본 발명은 문치가자미의 난황단백전구체 및 그 난황단백전구체를 이용한 성숙도 판정방법에 관한 것으로써, 더욱 상세하게는 문치가자미를 호르몬 처리한 후, 혈액을 전채혈 하고, 상기 체혈된 수컷 문치가자미의 혈장으로부터 난황단백전구체를 분리 정제한 다음, 상기 분리 정제된 난황단백전구체에 대한 다 클론 항체 및 단 클론 항체를 제작 후, 상기 두 종류의 항혈청을 이용한 샌드위치 면역효소측정 시스템(SANDWICH ELISA SYSTEM)을 개발하고, 이 면역효소측정 시스템에 의해 난성숙 단계에 따른 문치가자미의 혈중 난황단백전구체 농도를 측정하여 문치가자미의 성숙도를 판정함으로써 국내 주요 양식대상 어종인 가자미류의 성 성숙을 조기에 진단할 수 있는 목적으로 이용할 수 있을 뿐만 아니라, 국내연안에 사회적으로 큰 문제가 되고 있는 내분비계장애물질로 인한 수컷의 자성호르몬 효과를 간편하게 조기에 진단할 수 있는 키트(KIT)로 제작이 가능하여 산업적으로도 이용 가치가 높음은 물론, 성숙에 관련된 생리적 리듬을 연구하기 위한 생물학적검증법(BIOASSAY)으로 이용 가능하도록 하는 문치가자미의 난황단백전구체 및 그 난황단백전구체를 이용한 성숙도 판정방법에 관한 것이다.본 발명은 문치가자미의 혈장을 음이온 컬럼에 1MM 페닐 메틸 살포닐 프로라이드가 내포된 25MM 트리스-염산 완충액을 흘러 보내면서 NACL 농도 0.0M에서 0.5M의 농도구배에 의해 각 프랙션을 분취하고, 상기 분취된 각 프랙션을 3ML로 농축하여 겔 크로마토그래피에 투여하고 완충액을 흘러 보내면서 각 유출물을 3ML로 프랙션하여 분취하여 분리 정제한 문치가자미의 난황단백전구체에 특징이 있다.또한, 본 발명은 문치가자미의 혈장으로부터 난황단백전구체를 분리 정제하는 난황단백전구체 정제과정과, 상기 난황단백전구체 정제과정을 수행한 후, 난황단백전구체에 대한 항체를 제작하는 항체 제작과정과, 상기 항체 제작과정에서 생성된 항체 및 상기 난황단백전구체 정제과정에서 생성된 문치가자미 난황단백전구체를 이용하여 혈중 난황단백전구체의 농도에 의해 문치가자미의 성숙도를 판정하도록 하는 것에 특징이 있다. |
