| 초록 |
본 발명은 뇌신경세포의 사멸(이하 Apoptosis)과정에서 N-glycan의 시알릴화 및 당질화가 선택적으로 증가되는 α 2,3 시알산결합을 가진 당단백질에 관한 것이다. 1) 쥐 태아 뇌 cortical 에서 분리 배양한 신경세포에 Apoptosis를 유발하는 camptothecin을 투여하고 α 2,3결합 시알산을 인식하는 FITC-labeled MAA lectin을 이용한 조직화학법으로 확인한 결과, 투여한 camptothecin의 농도가 높아짐에 따라 α 2,3결합 시알산의 발현 양이 증가하였다. 2) HRP-labeled MAA로 Lectin blotting 에 의해 분자량 25.6kDa의 당단백질에서 α 2,3결합 시알산양이 증가하였다. 3) 구체적인 당쇄들의 구조 변화를 해명하기 위해 NP-HPLC로 전체 N-glycan 을 분석한 결과 biantennary N-glycan 이 Apoptosis과정에서 49%정도 줄어드는 반면 시알을 함유하고 있는 triantennary N-glycan 은 59% 증가하였다. 상기의 결과로부터 종양발생과 Apoptosis등 과 같은 세포생리학변화 과정에서 N-glycan에서 이 말단에 시알릴화 및 당질화가 증가 된 α 2,3시알산 결합을 가진 분자량 25.6kDa의 당단백질을 확인하였다. 본 발명은 종래의 기술보다 경제적으로 Apoptosis의 진단에 이용 할 수 있고 구체적인 당쇄들의 구조 변화까지 해명할 수 있는 NP-HPLC분석법으로 전체 N-glycan 을 분석하여 시알산 및 당질화 증가를 규명하였다. N-glycan의 시알릴화 및 당질화가 증가되는 α 2,3 시알산결합을 가진 당단백질을 통해 Apoptosis상태를 진단하는데 사용하는 것을 목적으로 한다. |
