| 저자(한글) |
XU, Jun-feng,WANG, Peng-fei,LI, Yue-ying,WANG, Xiao-fu,CHEN, Xiao-yun,PENG, Cheng,MIAO, Qing-mei |
| 초록 |
콜리플라워 모자이크바이러스 35S 촉진제(promoter of Cauliflower mosaicvirus 35S, CaMV35S)와 노팔린 합성효소 유전자 종결인자(terminator of nopaline synthase gene, tNOS)는 형질전환 제품의 선별 검출에서 선호하는 파라미터이다. 일반 검출과정 중 해당 2가지 요소의 선별 검출에 이용되는 개별적인 표준의 프라이머에는 비특이성 증폭과 감수성이 떨어지는 문제가 존재한다. 본 연구에서는 중국 내외 표준 중 자주 이용되는 증폭 조각이 각각 195, 165, 147, 123 bp인 CaMV35S과 증폭 조각이 각각 180, 172, 165, 118 bp인 tNOS의 각 4쌍의 프라이머를 수집한 후, 일반 PCR과 실시간 형광(Real-time) PCR기법을 이용하여, 8쌍 프라이머의 특이성, 감수성 및 가공품 중의 증폭성을 측정하고 적용성을 평가하였다. 연구 결과, CaMV35S 165과 147 bp 프라이머는 아주 양호한 특이성을 갖고 있었으며, 높은 감수성을 갖고 있었다. 또한 다양한 가공품에서도 강한 검출 능력을 나타냈으며, 선별 검출 효과가 가장 양호하였다. 195 bp 프라이머는 증폭성이 떨어졌으며, 비특이성 증폭 현상이 발생하였다. 123 bp 프라이머의 증폭은 기타 프라이머에 비해 약하고 불안적이었다. tNOS 172과 165bp 프라이머는 아주 양호한 특이성을 갖고 있었으며, 높은 감수성을 갖고 있었다. 또한 다양한 가공품에서도 강한 검출 능력을 나타냈으며, 선별 검출 효과가 가장 양호하였다. 180 bp 프라이머는 증폭성이 비교적 떨어졌으며, 비특이성 증폭 현상이 발생하였다. 118 bp 프라이머의 증폭은 기타 프라이머에 비해 약하고 불안정적이었다. 본 연구는 PCR과 실시간 형광(Real-time) PCR 을 통하여 다양한 세계 표준에 출현한 프라이머의 적용성을 평가하였으며, 형질전환 제품을 검출, 감독하는데 신뢰할만한 기술 근거를 제공하였다. |
