| 초록 |
토마토를 재료로, Northern 교잡기술을 이용하여 저온 스트레스 조건에서 토마토 MIR167(Sly-MIR167)의 발현 모드를 분석하였으며, 저온 스트레스에서 Sly-MIR167의 분자 조절 메커니즘을 확정하여, 토마토 품종 개량에서 유전자 공학의 실제 응용에 근거를 제공하였다. 분석 결과, (1) 25℃에서 Sly-MIR167은 토마토 뿌리, 줄기, 꽃잎, 과실, 엽편에서 모두 발현되었으며, 4℃ 저온 스트레스 조건에서 발현량은 증가하였는데 이는 Sly-MIR167의 발현은 저온에 의해 유도된다는 것을 설명한다. (2) 농간균 감염을 이용하여 발현 벡터를 구축하고 토마토에 전환시켜 형질전환 식물체를 얻었다. 저온 스트레스 실험 결과, 저온 스트레스 조건에서 형질전환 식물체의 생장 상황은 대조군에 비해 뚜렷하게 우수하였다. 이 외, 저온 스트레스 조건에서 2개 형질전환 식물체 품종(T 2 -5와 T 2 -19)의 최대 광화학효율, 엽록소 함량의 감소 폭은 야생형에 비해 뚜렷하게 낮았다. 프롤린 함량은 야생형에 비해 높았다. MDA 함량은 야생형에 비해 낮았는데 이는 Sly-MIR167이 저온 스트레스에서 토마토의 내성을 향상시킬 수 있다는 것을 설명한다. (3) miRU 온라인 소프트웨어를 통하여 Sly-MIR167의 표적 유전자가 NF-YA1, NF-YA2라는 것을 예측하였으며, RT-PCR 기술을 이용하여 그 발현 감소를 분석함으로써 MIR167에 의해 음성조절(negative regulation)된다는 것을 증명하였다. |
