초록 |
Enterococcus faecalis ATCC 29212 균주의 염색체로부터 클로닝된 다제 내성 유전자 emeA의 발현은 항생제 및 여러 약제에 대해 내성을 나타내며, DAPI와 Hoechst 33342 등을 배출하는 것으로 보고되었다. 본 연구에서는 약제 초감수성 숙주균주인 대장균 KAM32에 emeA 유전자를 발현시키고, 다제배출 펌프단백질인 EmeA의 생화학적인 특징에 대해 발표한다. EmeA는 393개의 아미노산으로 구성되어 있으며, Major Facilitate Super Family의 전형적인 특징인 12개의 막관통구조를 가지고 있었다. 또한 Lactococcus lactis의 Blt 및 Staphylococcus aureus의 NorA, 그리고 Escherichia coli의 TetA 등과 아미노산 서열에서 상당한 유사성을 나타내었다. 형광기질인 ethidium bromide와 acriflavine을 이용한 약제축적활성 실험에서 EmeA를 발현하는 균주는 대조균주에 비해 현저하게 낮은 세포내 약제축적을 나타내었으며, ethidium bromide를 이용한 약제배출활성 실험에서 EmeA 발현균주는 에너지 의존적인 ethidium bromide 배출활성을 나타내었다. 또한 약제배출 펌프단백질로 알려져 있는 reserpine은 EmeA의 ethidium bromide 배출활성에 대해서도 강력한 저해활성을 나타내었다. |