| 저자(한글) |
ZHANG, Xue-mei,ZHAO, Cai-hong,LI, Jun,LUO, Xiao,JIANG, Kui |
| 초록 |
쥐에서 유래된 인체 유선암 억제의 다약제 내성 관련 단백질1(multidrug resistance-associated protein 1, MRP1/ABCC1) 파지(phage) Fab 항체 라이브러리의 구축은 우선 유선암 조직의 파쇄액(homogenate)을 면역원으로 하여 BALB/c 쥐를 면역하였으며, 성공적으로 면역한 후 쥐 비장 조직의 총 RNA를 추출하여 cDNA로 역전사하였다. 다음, 쥐 IgG 각 서브유형의 특이성 Fab 프라이머를 설계하고, PCR로 Fd와 L 유전자를 증폭한 후 파지 벡터 pComb3에 순서대로 연결시켰다. 재조합체 pComb3-Fab를 E.coli XL1-Blue균에 전환시키고, 마지막으로 보조 파지 VCSM13의 중복 감염을 거쳐, 파지 Fab 항체 라이브러리를 성공적으로 구축하였다. 화학 합성의 MRP1/ABCC1-10 펩타이드를 항원으로 하여 3번의 현탁 분리, 농축을 진행하였으며, 현탁 분리 후 얻은 각 레벨의 파지 항체 라이브러리에 대해 ELISA 검출과 감정을 진행하였다. 성공적으로 얻은 MRP1/ABCC1-10 펩타이드 저항의 3급 파지 Fab 항체 라이브러리는 인체 유선암을 억제하는 MRP1/ABCC1 Fab 항체의 준비제작 제공에 도움을 주었다. |
