저자(한글) |
Chen, Huihui,Zhong, Fei,Li, Xiujin,Wang, Lu,Sun, Yan,Neng, Changai,Zhang, Kao,Li, Wenyan,Wen, Jiexia |
초록 |
목적: 개의 인터류킨-2(canine interleukin-2, cIL-2)와 개의 IL-7(cIL-7) 유전자가 개파보바이러스(canine parvovirus, CPV) VP2 단백질 DNA 백신 면역력 향상에 미치는 협력 작용을 연구하는 것이다. 기법: cIL-2와 cIL-7 더블 유전자의 비시스트로닉 벡터(bicistronic vectors)는 내부 리보솜 유입점(internal ribosome entry, IRES)을 포함하고 있는 진핵 세포 발현 벡터를 이용하여 구축되었다. 그리고 CPV, VP2, cIL-2와 cIL-7 발현 벡터와 더블 유전자 벡터를 이용하여 서로 다른 조합으로 마우스에 면역을 진행 즉 VP2로 VP2+cIL-2를 일 회 면역, VP2+cIL-7과 VP2+cIL-2/cIL-7로 동시 면역하였다. ELISA법을 이용하여 면역 후 서로 다른 시간 대에 마우스 혈청 VP2의 항체 수준을 측정하였으며 중화 항체의 역가를 분석하였다. 또 세포 증식 실험으로 면역 후 마우스 비장 림프구의 증식 반응을 측정하였으며 ELISA법으로 마우스의 림프구 gamma;인터페론(interferon- gamma;)의 발현 수준을 측정하였다. 결과: 본 실험에서 구축한 더블 유전자 발현 벡터의 구조는 정확하였으며 cIL-2와 cIL-7 유전자는 진핵세포에서 진행되는 분비 발현의 동기화를 조율할 수 있다. 마우스 면역 결과, VP2+cIL-2/cIL-7 동시 면역 조(group)의 혈청 항체 및 중화 항체의 역가는 모두 VP2+cIL-2와 VP2+cIL-7 동시 면역 조(p lt;0.05)보다 높았다. VP2+cIL-2/cIL-7 동시 면역 조 마우스의 림프구 자극 지수는 기타 면역 조보다 상승하였으나 여전히 현저한 수준에 달하지 못하였으며 gamma;인터페론의 발현 수준은 기타 면역 조(p lt;0.05)보다 현저히 높았다. 결론: cIL-2와 cIL-7 유전자가 CPV VP2 DNA 백신 면역원성(immunogenecity)의 증가에 뚜렷한 협력 효과를 보인다. |