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논문 기본정보
Construction of 4-Hydroxyphenylacetate-3-hydroxylase A Expression Strain and Its Biotransformation Effect on Hydroxytyrosol
논문 개요
| 기관명 | NDSL |
|---|---|
| 저널명 | 中國生物工程雜誌 = Journal of Chinese biotechnology |
| ISSN | 1671-8135, |
| ISBN |
논문저자 및 소속기관 정보
| 저자(한글) | QIAN, Xin,GUO, Hong-yan,ZHOU, Qing-feng |
|---|---|
| 저자(영문) | |
| 소속기관 | |
| 소속기관(영문) | |
| 출판인 | |
| 간행물 번호 | |
| 발행연도 | 2015-01-01 |
| 초록 | 목적: HHA(4-hydroxyphenylacetate-3-hydroxylase A)를 발현하는 재조합 균주를 구축한다. 그리고 티로솔(Tyrosol)을 기질로 하는 재조합 균주의 형질전환을 통하여 하이드록시타이로솔(Hydroxytyrosol)를 생산한다. 기법: 대장간균 BL21(DE3)을 템플렛으로 사용하여 HHA 유전자를 증폭한다. 효소 절단을 통하여 발현 벡터 pET-28a와 연결하여 재조합 발현 벡터 pET28a-HHA를 구축한다. 재조합 벡터를 감수성 세포 BL21(DE3)에 형질전환하고 재조합 균액에 적당한 양의 티로솔을 첨가한다. 세포 내 재조합 효소를 이용하여 티로솔에 카로복실기를 첨가하여 하이드록시타이로솔를 합성한다. 세포를 원심분리한 후 박층 크로마토그래피와 기체 크로마토그래피-질량분석(GC?MS)을 각각 사용하여 상층액 중 하이드록시타이로솔의 형질전환 결과를 검사한다. 결과: IPTG 유도 발현 후 SDS-PAGE 분석 결과, 분자 질량이 각각 58.8 kDa와 18.5 kDa인 단백질 밴드를 얻은 것으로 확인되었다. 박층 크로마토그래피와 기체 크로마토그래피-질량분석 결과에서 모두 촉매화 산물인 하이드록시타이로솔 생성을 확인할 수 있었다. 결론: HHA를 발현하는 재조합 균주의 구축에 성공했다. 이 균주로 티로솔을 하이드록시타이로솔로 효과적으로 형질전환할 수 있다. |
| 원문URL | http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART75844986 |
| 첨부파일 |
추가정보
| 과학기술표준분류 | |
|---|---|
| ICT 기술분류 | |
| DDC 분류 | |
| 주제어 (키워드) | Escherichia coli,Tyrosol,Hydroxytyrosol,Biotransformation,대장간균,티로솔,하이드록시타이로솔,생물전환 |