| 저자(한글) |
YU, Fu-xian,ZHU, Zhi-wei,CHEN, Xiao-yu,HUANG, Jing,SHI, Ming,TENG, Fei,PAN, Jian-zhi |
| 초록 |
가금류(poultry)의 원시 생식세포(primordial germ cells, PGCs)는 정자와 난자를 형성하는 전구세포로서, 성 성숙된 가금의 체내에서 정자와 난자를 형성할 수 있다. 그러므로 가금류의 PGCs는 PGCs 기반의 현대 보존기술, 형질전환 기술 및 가금의 발육생물학 등 연구 분야에 응용될 수 있으며, 또 중요한 과학 연구와 응용 가치를 가진다. 본 연구에서는 Nycodenz 밀도 기울기 원심분리법을 이용하여 13~15단계까지 부화한 닭(Gallus gallus)의 배아 혈액에서 닭 배아 PGCs를 분리하고 정제하였다. 미세 주사침으로 선별한 후, PGCs의 순도는 99% 이상에 달하였으며, 세포 직경은 주요하게 13~15 μm이었다. 알칼리성 인산가수분해 효소(alkaline phosphatase, AKP) 염색, 과요오드산 쉬프(periodic acid schiff, PAS) 염색 및 발생단계 특이적 태아성 항원1(stage specific embryonic antigens-1, SSEA-1) 면역화학적 염색 등 기법을 이용하여, 분리, 정제한 PGCs를 감정한 결과, 모두 PGCs 특유의 반응을 발견할 수 있었다. 생세포 형광 염료 PKH26를 이용하여, 분리, 정제한 PGCs을 표시하였으며, 형광 현미경을 통하여 성공적으로 표시한 PGCs에서 적색 형광을 관찰할 수 있었다. 표시한 약 200개의 PGCs를 복대동맥을 통하여 14~16단계까지 부화한 개체의 수용체 닭 배아에 주입하였을 때, 부화한 지 8일 되는 닭 배아의 생식선 동결 절편에서 공여체 PGCs를 검출할 수 있었는데, 이는 분리, 정제한 PGCs가 수용체 닭 배아의 생식선에 정착할 수 있다는 것을 설명한다. 본 연구는 PGCs 기반의 유전자원 보존 및 형질전환 기술의 연구를 위하여 기초 자료를 제공하였다. |
