| 저자(한글) |
ZHENG, Zhi,NIU, Hua,ZHANG, Gui-qian,FAN, Xin,GAO, Yu-hong,SUN, Lu |
| 초록 |
Syncytin은 인류의 내인성 역전사 바이러스 W 패밀리의 낭막 단백질이다. 최근 연구 결과에서 Syncytin이 백혈병과 밀접한 연관이 있다는 것을 발견하였다. Syncytin의 생물학 기능을 연구하기 위하여, 우리는 인간의 syncytin을 복제하고 pIRES2-EGFP 플라스미드에 연결하였으며, 플라스미드를 콤피턴스(competence) 대장균 DH5α에 형질전환하였다. 그리고 양성 클론을 선택하여 PCR, 효소 절단 전기영동 및 DNA 서열 측정 등 감정 실험을 실행함으로써, syncytin 유전자를 발현하는 진핵 발현 벡터를 성공적으로 구축하였다. 라로슈 형질전환 시약을 이용하여 재조합 플라스미드를 EL4 세포에 형질전환하였으며, G418 선택성 배양기를 선별하고 형광 현미경을 사용하여 세포에서 Syncytin의 발현 상황을 감정하였다. 그리고 RT-PCR, Western blot 방법으로 Syncytin 발현 수준을 검측한 결과, 인간의 Syncytin을 안정적으로 발현하는 EL4 세포계를 성공적으로 구축하였다. 인간의 Syncytin을 안정적으로 발현하는 EL4 세포계를 구축한 실험 결과는 인간의 Syncytin 기능 및 해당 세포계와 백혈병 면역회피(immune escape) 간 관계를 더 한층 깊이 연구하는데 중요한 세포 모델과 실험 기초를 제공하였다. |
