Cloning and Expression Analysis of Cyt b5 Gene Involved in Electron Transfer in Gossypium hirsuturm
기관명 | NDSL |
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저널명 | 中國生物工程雜誌 = Journal of Chinese biotechnology |
ISSN | 1671-8135, |
ISBN |
저자(한글) | LIU, Jin-zhi,SI, Huai-jun,ZHANG, Ning,WU, Jia-he |
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저자(영문) | |
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소속기관(영문) | |
출판인 | |
간행물 번호 | |
발행연도 | 2013-01-01 |
초록 | 육지면(cotton)의 품종 목화35 염류장해 EST 라이브러리에서 기타식물과 높은 동원성있는 시토크롬 b5단백질(cytochrome b5 proteins, Cyt b5) 유전자조각을 선별한다. RACE기술을 이용하여 Cyt b5 유전자의 cDNA서열을 획득하여 GhCyt b5라 명명한다. 유전자 총길이 810bp, 가장 큰 해독틀 402bp, 인코딩이 134개의 아미노산으로 이루어진 단백질, 분자량은 약 17kDa이다. 이 유전자의 인코딩서열을 원핵발현벡터 pET32a에 삽입하여 재조합 플라스미드 pET32a-Cyt b5를 구축한다. 다양한 조건에서 단백질유도 발현분석을 진행한다. 그 결과가 28℃와 1mmol/L IPTG 조건에서 용해성 있는 GhCyt b5단백질을 얻을 수 있다. Ni 2+ 칼럼 친화성 크로마토그래피 정화 및 SDS-PAGE 검증분석 결과 획득한 재조합 단백질은 목적단백질이다. 목화세포 물질의 추출을 반응매개체로 하여 생체와 전자전달 기능분석을 진행한다. 그 결과 GhCyt b5는 환원상태에서 산화상태로 변화하여 전자의 전달기능에 참여한다. |
원문URL | http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART69976043 |
첨부파일 |
과학기술표준분류 | |
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ICT 기술분류 | |
DDC 분류 | |
주제어 (키워드) | Gossypium hirsuturm L.,Cyt b5,Prokaryotic expression,Electron transfer,목화,시토크롬 b5단백질,원핵발현,전자전달 |