저자(한글) |
DONG, Qin,YE, Chun-lin,GAO, Feng,CUI, Jie,CHEN, Pei,WANG, Shao-liang,CAI, Chen |
초록 |
목적: PAMAM 덴드리머(polyamidoamine dendrimer, PAMAM-D)로 CXCR4-shRNA를 운반하는 나노 복합 입자(PAMAM-shRNA)를 제조하여 그것이 체외에서 인간 신장암 A498 세포의 증식을 억제하는 효과를 연구하였다. 방법: 실내 온도 조건에서 제7대의 PAMAM-D를 CXCR4-shRNA(질량비가 1:0.73)와 혼합하여 나노 덴드리머와 CXCR4-shRNA의 나노 복합물 PAMAM-shRNA를 제조한 다음, 투과 전자현미경을 통하여 PAMAM-shRNA의 형태 구조를 관찰하였으며 또한 레이저입도분석기를 통하여 그 입경을 측정하였다. PAMAM-shRNA, CXCR4-shRNA 및 PAMAM-D를 A498 세포에 각각 감염시킨 후, MTT법, 유세포 분석법, Real-time PCR 등을 통하여 PAMAM-shRNA가 신장암 세포 A498의 증식에 대한 억제 작용, PAMAM-shRNA로 유도되는 A498 세포의 사멸 상황, 감염 후 신장암 A498 세포 CXCR4 mRNA의 발현 수준 등을 각각 검사하였다. 결과: 성공적으로 제조한 신형의 나노 복합 입자 PAMAM-shRNA는 분산성이 좋고 잘 달라붙지 않았으며 그 평균 입경은 (176.5±25.48)nm였다. PAMAM-shRNA는 인간 신장암 세포 A498의 증식을 효과적으로 억제할 수 있었고, 또한 PAMAM-shRNA 농도 및 약물 작용 시간의 증가에 따라 그 억제 효과는 더 뚜렷하였으며, 최고 증식 억제율은 (66.5±2.7)%에 도달하였다. 그리고 신장암 A498 세포의 사멸도 촉진할 수 있었다. Real-time PCR로 검사한 결과, CXCR4-shRNA 그룹에 비하여 PAMAM-shRNA 그룹에서 CXCR4 mRNA의 발현 수준은 뚜렷하게 감소하였다[(0.29±0.035)vs(0.70±0.084), P 결론: PAMAM-D는 CXCR4-shRNA를 효율적으로 A498 세포에 운반할 수 있고, PAMAM-shRNA는 사용량 및 시간에 의존하여 신장암 세포의 증식 및 신장암 세포의 사멸을 뚜렷하게 억제할 수 있으며, 또한 종양 유전자 치료에서 잠재적인 응용 가치가 있다. |