| 저자(한글) |
WANG, Miao,LI, Yuan-yuan,YUE, Chang-wu,SHAO, Mei-yun,LV, Yu-hong,BAO, Yu-xin,HUANG, Ying |
| 초록 |
본 논문은 해양에서 유래한 스트렙토마이세스 Streptomyces olivaceus FXJ7.023의 유전체 서열 측정 결과에 근거하여 특이적 프라이머(specific primers)를 설계하였고, PCR 증폭을 통하여 1가닥의 전체 길이가 1,788 bp인 글리코사이드 가수분해효소 15(glycoside hydrolases 15) 패밀리 단백질에 속하는 새로운 구성원의 완전한 코딩 영역 DNA 단편을 획득하였다. 해당 단편은 595개 아미노산 잔기를 코딩하였고, 분자량이 66.2 kD인 추정 단백질(putative protein)이었다. 유전자 공학 기술로 해당 단편을 재조합하여 원핵 발현 플라스미드 pET32a에 주입한 후 숙주균 BL21(DE3) plySs에 전환하였고, IPTG 유도로 융합 단백질을 발현시켰다. 발현된 봉입체(inclusion body) 융합 단백질을 정제, 복원한 후 DNS 방법으로 해당 단백질이 서로 다른 온도, pH 조건에서 서로 다른 기질을 촉매화하여 생성한 환원당의 활성을 측정하였다. 연구 결과, 해당 효소는 섬유소, 전분 등 다양한 기질을 가수분해하여 환원당을 생성하는 활성이 있었으며, 또한 서로 다른 기질에서 서로 다른 가장 적합한 pH와 가장 적합한 반응 온도가 있었다. |
