| 초록 |
DNA를 인식하여 절단하는 제한효소의 발견은 실험실에서 유전자를 연구, 조작할 수 있게되어 분자생물학 연구에 큰 발전을 가져왔다. 제한효소의 인식자리는 반응용액의 산도, 이온세기, 소수성, 유기용매, 효소의 양에 따라서 달라질 수 있다. 본 연구는 유전공학에서 가장 많이 이용되고 있으며 그의 3차 구조가 밝혀진 EcoRI 제한효소가 유기용매에 의한 특이성 변화를 연구하였다. 이 효소의 특이성은 에탄올, ethyleneglycol, DMSO와 같은 유기용매에 의하여 변화되며, 이 변화는 유기용매의 소수성(LogP)값과 밀접히 관계있다. EcoRI의 유기용매에 의한 특이성변화는 LogP값이 -2.0~0 사이에서 일어난다. Acetone, 2-methyl-propanol같은 그 효소를 쉽게 비활성화시키는 유기용매는 특이성을 변화에 영향을 주지못한다. 이러한 특이성 변화는 무질서하게 일어나지 않고 순서적으로 일어난다. 10% DMSO에서 EcoRI을 이용하여 pGEM3를 절단할 때 다음 절단자리는 TAATTC, GAGTTC순서로 절단된다. 이와 같은 제한효소의 반응조건을 바꾸면 고유의 절단자리가 아닌 다른자리를 절단할 수 있으며 이러한 기술은 유전공학에 이용될 수 있다. |
