초록 |
Bacillus megaterium이 생산하는 ${ gamma}-cyclodextrinase({ gamma}-CDase)$ 염석, DEAE-trisacryl, Ultrogel AcA 24 및 Ultrogel HA column chromatography 등의 방법으로 부분정제한 결과 specific activity는 120.4 units/mg protein으로 조효소액에 비하여 125.4배 정제되었다. 부분정제한 ${ gamma}-CDase$ 는 SDS-ployacrylamide gel 전기영동에 의해 2개의 band로 나타났으며 band I과 band II의 분자량은 각각 64,000과 50,000이었다. ${ gamma}-CDase$ 의 최적 pH는 6.0, 최적 온도는 $60^{ circ}C$ 이었고, $45^{ circ}C$ 이하의 온도와 pH $6.0{ sim}9.0$ 에서 안정하였으며, ${ gamma}-CD$ 에 대한 Km값은 0.903 mM이었다. $Mg^{2+}$ 와 $Mn^{2+}$ 이온에 의해 활성이 증가한 반면, $Hg^{2+}$ 와 $Cu^{2+}$ 에 의해서는 활성이 현저하게 감소되었다. ${ gamma}-CDase$ 는 ${ alpha}-CD$ 와 ${ beta}-CD$ 에는 거의 활성이 없었고, ${ gamma}-CD$ 에는 매우 높은 활성이 나타내었으며, 이의 분해 생성물은 주로 glucose와 maltose이었다. |