| 초록 |
Cytochrome P-450-dependent monooxygenase (P-450-MO)는 스테로이드 등의 대사에 도 관여하지만 이물질 특히 환경오염물질 등의 생체내 활성화 대사를 촉진한다. 또한 P-450은 여러 동위 효소로 구성되어 있으며 각각의 기질 특이성을 나타낸다. 따라서 동위 효소 유도 물질로 phenobarbital (PB)과 3-methylcholanthrene (MC)을 흰쥐 (SP-D, male, 150-160g)에 각각 처리하여 간의 microsomes (mis)에 존재하는 P-450을 스펙트럼 차이로 부터 그리고 단일항체와 $^{35}S$ -rabbit antimouse IgG를 사용한 방사면역학적인 방법에 의해 P-450-b (P-450) type과 P-450-c (P-448) type이 주된 동위 효소로 각각의 mis에 존재하는 것을 확인하였다. 이와 같은 mis에 hesperetin (2,3-dihydro-5,7-dihydroxy-2-(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)-4H-1-benzopyran-4-one)을 첨가한 스펙트럼 특성은 동일한 modified type II (Peak, 415 nm; trough, 385 nm)를 나타내므로서 hesperetin이 MO에 대한 억제효과가 있음을 알았다. hesperetin의 benzo(a)pyrene hydroxylase (BPH), 7-ethoxycoumarin O-deethylase (ECDE), aniline hydroxylase (AH)에 대한 inhibitory potency ( $I_{50}$ )는 PB-mis 또는 MC-mis, 즉, P-450의 동위 효소에 따라 다소 차이는 있으나 측정된 MO 들의 활성도에 상관 없이 비교적 강력한 것으로 나타났다. 한편 MO에 대한 hesperetin의 inhibition type과 inhibition constant ( $K_i$ )를 측정한 결과 PB-mis-BPH에 대하여 noncompetitive inhibitor로 작용했으며 이때의 $K_i$ 값은 $5.42 ;{ mu}M$ 이었다. 그리고 MC-mis-BPH에는 mixed inhibitor로 $K_i$ 값은 $14.5 ;{ mu}M$ 로 전자보다 높았다. 또한 MC-mis-ECDE에는 hesperetin이 mixed inhibition을 나타냈으며 $K_i$ 값은 $1.67 ;{ mu}M$ 로 competitive inhibition을 나타내는 PB-mis-ECDE의 $18 ;{ mu}M$ 보다 상당히 낮았을 뿐 아니라 BPH의 값들보다도 훨씬 낮은 경향이었다. PB-mis-와 MC-mis-AH에는 hesperetin이 같은 mixed inhibitor로 작용했으며 $K_i$ 값은 각각 20.5, $34 ;{ mu}M$ 로 높은 수치를 보였다. 따라서 hesperetin의 MO에 대한 선택적이며 차별적인 억제효과는 측정되는 mis에 따라 그리고 MO에 따라 상당한 차이를 보이고 있으며 특히 MC-microsomal P-450-dependent ECDE에 가장 강력한 억제효과를 나타냈다. |
