| 저자(한글) |
WANG, Zhen-wei,LI, Gang-rui,LI, Lin-li,WANG, Shuai-kun,MENG, Yan-fa |
| 초록 |
목적 : 토끼근육 글리세롤-3-인산탈수소효소의 분리정화 방법 및 효소학 성질을 연구하여 혈청 트리글리세리드를 측정하기 위한 효소결합 시약개발에 실험기초와 이론적인 근거를 제공하는 것이다. 기법 : 황산암모늄 분별침전, DEAE-Sepharose, Blue-Sepharose, 수산화 인회석으로 토끼근육 글리세롤-3-인산탈수소효소를 정화한다. 겔여과 및 경사도 PAGE(5%~15%)법으로 효소 분자량을 측정한다. 통상적인 효소학적 동력학 분석방법으로 pH, 온도, 기질농도, 부분적 금속이온 및 유기화합물이 효소 촉매반응에 대한 영향을 고찰하였다. 결과 : 정화한 토끼근육 글리세롤-3-인산탈수소효소는 PAGE(12%)로 분석한 결과 단일밴드를 갖는다. 효소 분자량은 115~122kDa, 효소 최적온도는 45℃이고 최적 pH9, pH범위 6~9이고 온도가 45℃이하일때 열 안정성이 가장 좋다. 가장 적합한 조건에서 3-인산탈수소효소 및 NAD+가 기질일때 측정한 효소의 Km는 각각 7.4×10 -3 mol/L, 1.47×10 -4 mol/L이다. Ba 2+ 、 Mn 2+ 、 Fe 2+ 、 Al 3+ 、 Cu 2+ 、 Ni 2+ 、 Ag + 、 Hg 2+ 、 NaN 3 ,EDTA는 효소에 대해 일정한 정도로 제어작용을 한다. Mg 2+ 、 Ca 2+ 、 Co 2+ 、 Zn 2+ 는 일정한 정도의 활성화 작용이 있는데 그 중 Co 2+ 및 Zn 2+ 은 효소에 대한 활성화 작용이 200%이상에 이른다. 유기화합물 NaF는 효소의 활성에 대해 영향이 없다. |
