| 저자(한글) |
WANG, Bao-quan,LI, Xia,PING, Juan,LI, Feng,ZHANG, Wei,ZHANG, Yong-zhou,PANG, Xiao-bin |
| 초록 |
본 논문에서는 SELEX 기술(systematic evolution of ligands by exponential enrichment)을 사용하여 인간 과산화물 제거 효소(superoxide dismutase, SOD)의 특이적 앱타머(specific aptamer)를 선별하였다. 길이가 78 bp이고 35개 무작위 서열을 함유하는 단일 가닥 DNA 라이브러리(single-stranded DNA library, ssDNA)를 체외에서 화학적으로 합성하였다. 각각 비대칭 PCR 방법과 비오틴-스트렙타아비딘 자기 구슬 분리 방법(biotin-streptavidin magnetic bead separation method)을 사용하여 ssDNA 라이브러리를 제조하였다. 또한, 얻은 효과를 비교하여 비오틴-스트렙타아비딘 자기 구슬 분리 방법으로 ssDNA 라이브러리를 제조하는 것을 확정하였다. 니트로섬유소막(nitrocellulose membrane)을 매질로, SOD 단백질을 표적으로 하여 해당 친화성 핵산 앱타머를 선별하였고, 효소 결합 기구(enzyme-linked instrument)를 사용하여 D 450 값을 측정하였다. 이로써 각 라운드 ssDNA 라이브러리와 표적 분자의 결합률을 계산하였다. 11 라운드의 선별 후, ssDNA 라이브러리와 SOD의 무작위 결합률은 조기의 0.47%에서 37.5%까지 올렸다. 그리고 선별 라운드 수의 증가와 더불어 ssDNA와 표적 분자의 결합률은 안정적인 추세로 나아갔다. 친화성이 높은 SOD 효소의 특이적 핵산 앱타머를 조기 선별하여 SOD 신약과 모의 약물을 한층 더 개발하고 연구하는데 참고적인 정보를 제공하였다. |
