| 초록 |
목적 : L-시스테인(L-cysteine)을 생물전환(bioconversion)하는 활성이 높은 균주를 배양하고, 또한 효소를 생산하는 배지를 통계적 최적화(statistically optimize)하는 것이다. 방법 : 슈도모나스균 Pseudo-monas sp.B-3에 자외선을 조사하여 돌연변이를 유발하였으며, 또한 반응표면법(response surface methodology)으로 돌연변이 균주가 효소를 생산하는 조건을 최적화하였다. 결과 : 돌연변이를 유발한 후, 1주(strain)의 유전적 기능이 안정하고 효소활성이 1459U/mL인 L-시스테인 생물전환균주 Pseudomonas sp.C-46를 배양하였다. 배양한 균주의 효소활성은 배양 전의 균주보다 39.9% 높았다. 최적화 후 돌연변이균주가 효소를 생산하는 최적 배지조성(g/L)은 DL-ATC.3H 2 O 8.6, 글리세린(glycerol) 15.4, 쇠고기 추출물(beef extract) 9.9, 펩톤(peptone) 8, 염화나트륨(NaCl) 8, MnSO 4 .H 2 O 0.4, 효모 추출물(yeast extract) 4였다. 최적화 배지에서 배양한 균주의 효소활성은 1671U/mL이고, 균주가 생물전환하여 생산한 L-시스테인의 최대농도는 5.1g/L에 달하였는데, 이는 최적화되지 않은 균주가 생산한 L-시스테인의 농도보다 21.4% 높았다. 결론 : 1주의 효소활성이 높은 L-시스테인을 생산하는 돌연변이 균주를 얻었으며, 또한 효소를 생산하는 최적조건을 확정하였다. |
