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논문 기본정보
Cloning, prokaryotic expression and characterization of lysine decarboxylase gene from Huperzia serrata
논문 개요
| 기관명 | NDSL |
|---|---|
| 저널명 | 生物工程學報 = Chinese journal of biotechnology |
| ISSN | 1000-3061, |
| ISBN |
논문저자 및 소속기관 정보
| 저자(한글) | DU, Ci,LI, Jing,TANG, Yun-tao,PENG, Qing-zhong |
|---|---|
| 저자(영문) | |
| 소속기관 | |
| 소속기관(영문) | |
| 출판인 | |
| 간행물 번호 | |
| 발행연도 | 2014-01-01 |
| 초록 | 리신 탈탄산 분해효소(Lysine decarboxylase, LDC)는 치매 방지 약품-후페리진(Huperzine-A) 바이오 합성의 첫번째 효소이다. 뱀톰(Huperzia serrata) 내 LDC 특성과 기능 연구를 위해, 총 RNA를 템플릿으로 하고 RT-PCR 증폭에 의해 획득한 세린 탈수소효소 유전자 LDC1과 LDC2를 pMD ® 19-T 내에 복제하여 서열을 측정하였다. 측정 결과, 두개 유전자의 상동성이 95.3%이고 각각 212, 202개 아미노산을 코딩하였다. 두 유전자를 pET-32a(+)에 도입하여 재조합 발현 플라스미드 pET-32a(+)/LDC1과 pET-32a(+)/LDC2를 구축한 후, BL21(ED3) 내에 각각 형질전환하여 유도 발현시켰다. 결과 30℃ 조건에서 가용성 발현 산물 Trx-LDC1과 Trx-LDC2를 획득하였다; 표적 단백질을 Ni-NTA 친화성 크로마토그래피로 정제하고 효소 촉매 반응계를 구축하여, 해당 탈수소효소 활성을 분석하였다. 박층 크로마토그래피(TLC) 검측 결과, 재조합 융합 단백질 Trx-LDC1과 Trx-LDC2가 모두 세린 탈수소 촉매로 카다베린을 생성할 수 있었다. 생물정보학 소프트웨어 분석 결과, LDC1과 LDC2의 물리 화학적 성질 간에 비록 차이가 존재하지만, 2급 구조와 3차원 구조 예측 결과는 기본적으로 일치하였다. |
| 원문URL | http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART71327231 |
| 첨부파일 |
추가정보
| 과학기술표준분류 | |
|---|---|
| ICT 기술분류 | |
| DDC 분류 | |
| 주제어 (키워드) | Huperzia serrata,lysine decarboxylase,gene cloning,prokaryotic expression,enzyme activity,structure prediction,뱀톱,리신탈카르복실화효소,유전자 복제,원핵 발현,효소 활성,구조 예측 |