초록 |
식물 엽록소의 생물 합성 경로(마그네슘 분지) 중 첫번재 효소는 마그네슘 이온의 결합효소로서, I(ChlI), D(ChlD)와 H(ChlH) 등 3개 서브유닛으로 구성되었다. 각 서브유닛은 엽록소의 생물 합성에 참여할 뿐만 아니라, 엽록체로부터 세포핵까지의 역방향 신호 전달과 관련된다. Gun4는 포르피린 결합 단백질로서, 식물 마그네슘이온 결합효소의 활성을 향상할 수 있다. 그러나 Gun4가 부족한 조건에서, 마그네슘이온 결합효소는 매우 불안정하므로 촉매반응을 일으킬 수 없다. 우리는 기존의 연구에서 Gun4의 C 말단에 있는 몇 개 아미노산이 중요한 작용을 한다는 것을 발견하였다. 본 논문에서는 결실 돌연변이를 통하여 C 말단의 8개 아미노산 잔기가 결실된 돌연변이 Gun4(Gun4L)를 얻었다. 효모 이중 교잡과 GST-pull down 실험을 통하여, Gun4L이 여전히 H 서브유닛과 상호 작용할 수 있다는 것을 발견하였다. 그리고 원핵발현과 Gun4L, 마그네슘이온 결합효소의 서브유닛에 대한 정제를 통하여 재조합 마그네슘이온 결합효소의 효소 활성을 분석한 결과, Gun4L은 마그네슘이온 결합효소의 활성이 사라지게 하는 작용이 있었다. |