| 저자(한글) |
ZHOU, Dan-xia,WEI, Rong-ping,KANG, Xin,QIAN, Zheng-zong,JI, Yan-ling,YU, Han-shou |
| 초록 |
[목적] 대장간균 가운데서 꿀벌 스피로플라스마(Spiroplasma) 세포 골격 관련 유전자 mreB1-5를 클론 발현하며 코딩된 단백질의 물리 화학적 성질을 예측한다. 그리고 이런 유전자가 스피로플라스마 나선형(spiral)과 비나선형(non-spiral) 2가지 형태에서의 발현 수준을 분석하여 해당 유전자 기능의 분석에 기초를 마련한다. [기법] PCR 증폭을 통하여 스피로플라스마 CH-1 유전체로부터 mreB1-5 유전자를 얻는다. 구축된 재조립 발현 벡터 pETmreB1-5를 각각 대장균 BL21 가운데서 발현을 유도한다. 니켈 친화성 수지(nickel affinity resin)를 이용하여 재조합 단백질을 정화(purify)하며 온라인 도구(online tool)를 통하여 MreB 단백질의 물리 화학적 성질과 기능 영역을 예측한다. Real-Time PCR를 이용하여 스피로플라스마 CH-1이 2가지 서로 다른 형태에서의 mreB1-5 유전자 발현량을 비교한다. [결과] 5개의 mreB 유전자를 성공적으로 클론했으며 대장균 BL21 가운데서 고효율적으로 발현하였다. MreB 단백질 분자량은 각각 36, 23, 23, 37, 25kD이고 모두 소수성(hydrophobic) 단백질 이며 MreB/Mbl 단백질군(protein family)에 속했다. 형광 정량 PCR 결과, 스피로플라스마가 비나선형 상대일 때 mreB1-5 유전자의 발현 수준은 나선형 상태일 때의 유전자 발현 수준보다 크게 낮았다. [결론] 본 연구에서는 처음으로 스피로플라스마 세포 골격 관련 유전자 mreB1-5를 클론 발현한다. 이로써 이런 유전자가 스피로플라스마 형태 방면에서 매우 중요한 작용을 가질 수 있어 향후 스피로플라스마 mreB 유전자가 운동과 형태 방면에서의 기능을 연구하는데 중요한 정보를 제공한다. |
