| 저자(한글) |
WANG, Xi,LU, Wen-liang,YAO, Ming-ze,HU, Feng-yun,FU, Yue-jun,LIANG, Ai-hua |
| 초록 |
중성 피타아제(neutral phytase)의 특성을 연구하기 위해 바실러스균 유래 피타아제 유전자 phy(ycD)를 대장균 발현 벡터 pET-28a(+)에 도입하여 유도 발현시킨다. 그리고 Ni-NAT 및 Superdex-75를 사용하여 정제한 다음 재조합 피타아제 r-phy(ycD)의 특성을 분석한다. 분석 결과 본 효소는 Ca 2+ 의존적 효소이며 Ca 2+ 최적 농도는 1mmol/L, 비활성(specific activity)은 4.7U/mg, 효소 촉매반응의 최적 pH는 6.5인 것으로 나타났다. 중성 환경(neutral environment)에서 안정적이었고 최적 반응 온도는 45℃이고 K m 값과 V max 값은 각각 0.213mmol/L와 5.55U/mg이었다. Zn 2+ , Ni 2+ , Ba 2+ , Ag 2+ 모두 효소 촉매반응을 억제하였다. 연구 결과 Ca 2+ 는 중성 피타아제류 효소의 활성 및 열 안정성에 중요한 역할을 하는 것으로 나타났다. 이런 원인으로 발현 및 정제 과정의 배양배지 그리고 정제에 사용되는 각종 완충용액에 Ca 2+ 를 첨가할 필요가 있다. |
