Recombinant Expression,Purification and Antimicrobial Activity of SMAP-29
기관명 | NDSL |
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저널명 | 生物技術通報 = Biotechnology bulletin |
ISSN | 1002-5464, |
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저자(한글) | Zheng, Qiushi,Duan, Chenxi,Tao, Fengyun |
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저자(영문) | |
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소속기관(영문) | |
출판인 | |
간행물 번호 | |
발행연도 | 2013-01-01 |
초록 | 본 논문에서는 유전자 공정 기술을 이용하여 활성을 가진 재조합 SMAP-29 항균 펩티드(peptides) 발현을 연구 목적으로 하고 있다. 편집된 대장균 코돈(codon)에 근거하여 smap-29 유전자 서열을 최적화하며, 표적 펩티드 서열 N 말단에 엔테로키나아제(enterokinase) 식별점을 첨가하고 C 말단에 종결 코돈(termination codon)을 첨가하여 유전자 서열을 화학적으로 합성하였다. EcoR I과 Hind III 더블 제한 효소 사이트(sites)를 통해 pET-28a(+)에 연결하여 재조합 발현 벡터를 구축하였으며, 대장균 BL21(DE3)에 재조합 단백질을 발현하여 Ni-NTA 친화 크로마토그래피(affinity chromatography)를 만들어 엔테로키나아제(enterokinase)를 절단한 후 방출한 SMAP-29 항균 펩티드에서 항균 활성을 검측해냈다. 이는 6×His 태그(tag)와 엔테로키나아제 식별 사이트(sites)를 가지고 있는 SMAP-29 재조합 융합 단백질이 대장균속에서 봉입체(inclusion body) 발현을 하며, Ni-NTA 친화 크로마토그래피로 정제한 융합 단백질을 확보할 수 있음을 설명한다. 엔테로키나아제를 절단한 후 방출하는 SMAP-29 재조합 항균 펩티드가 대장균, 황금색 포도상구균(staphylococcus)과 모닐리아 알비캔스(Monilia albicans)에 대한 최소 항균 농도는 10, 20 그리고 40 mu;mol/L이었다. |
원문URL | http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART66523652 |
첨부파일 |
과학기술표준분류 | |
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ICT 기술분류 | |
DDC 분류 | |
주제어 (키워드) | Antimicrobial peptide,SMAP-29,Prokaryotic expression,Antimicrobial activity,항균 펩티드,SMAP-29,원핵발현,항균 활성 |