| 저자(한글) |
LIU, Yu-qing,WEI, Ting,ZHANG, Chao,ZHANG, Xiao-hua,YUAN, Li,DAI, He-ping |
| 초록 |
효모 DNA 손상 응답 메커니즘에 기반하여, 본 실험실에서는 초민감성 효모 HUG1-yEGFP 바이오센서를 구축하였으며, 검출 방법은 주요하게 유세포분석기(flow cytometry)에 의존한다. 검출방법을 간소화하고, 고처리량 검출을 실현하고자, 본 연구는 각종 조건을 모색하고 테스트하여 96-well microtiter plate에 더 적합하고 최적화한 형광효소 마이크로플레이트 리더에 의존하는 검출방법을 구축하였다. 결과, F1 배양기는 배경 형광이 비교적 낮은 배양기로써 형광효소 마이크로플레이트 리더에 의한 검출에 사용되며, 블랙의 투명한 세포 배양판의 96-well microtiter plates로 검출한 균액 체적은 100 μL이고 초기 균액 농도 OD 600nm 값은 0.05이다. 해당 최적화 검출 조건에서 초민감성 효모 HUG1-yEGFP 바이오센서와 전형적인 유전독성 물질 메틸 메탄술폰산(methyl methanesulfonate, MMS)으로 양호한 약효(dose-effect)와 시효(time-effect) 관계를 구축할 수 있으며, 이는 해당 바이오센서가 실제 응용의 실험 기초를 구비하고 있음을 설명한다. |
