A Preliminary Study of the Bioactivity and Crystallization of the Recombinant Glycerol Dehydrogenase from Streptococcus pneumonia
기관명 | NDSL |
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저널명 | 中國生物化學與分子生物學報 = Chinese journal of biochemistry and molecular biology |
ISSN | 1007-7626, |
ISBN |
저자(한글) | ZHAO, Sha-Sha,NIU, Si-Qiang,JIN, Li,YANG, Wei,WANG, De-Qiang |
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저자(영문) | |
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소속기관(영문) | |
출판인 | |
간행물 번호 | |
발행연도 | 2012-01-01 |
초록 | 글리세롤 탈수소 효소는 세포 글리세롤을 산화시켜 대사활동에 에너지를 제공하며 호스트 부착에 관한 세균 단백질 발현을 조절함으로써 잠재적인 항균 약물 타겟으로 된다. 본 논문은 대장균 BL21 원핵 발현 폐렴 연쇄상구균 글리세롤 탈수소 효소를 이용하여 대량의 표면에 뜨는 대상 단백질을 얻었다. 그리고 Ni-NAT-Sepharose Fast Flow 친화성 크로마토 그래피, DEAE-Sepharose Fast Flow 이온 교환 크로마토 그래피, Superdex 200분자체로 정화(purification)시키고 데이터의 적합성(pitting)으로 이 효소가 용액에서 호모다이머의 형태로 존재하는지를 확인한다. 또한, 분광 실험으로 본 재조합 발현 글리세롤 탈수소 효소가 여전히 글리세롤을 산화시켜 1, 3-디히드록시아세톤을 생성하는 활성을 가지고 있다는 것을 입증하였다. Hampton 시료 박스 상영 수정체 및 체스판 최적화 수정체(Hampton kits by the sitting-drop method)로 0.1mol/L Bicine pH 9.6, 13% PEG MME 5000, 0.2 mol/L KSCN, 4% Dioxone 조건에서 다중형태(Morphology)가 좋고 일정한 회절 능력이 있는 다결정을 얻었다. 이는 폐렴 연쇄상구균 글리세롤 탈수소 효소의 입체 구조 및 연구 구조와 효소 활동 간의 관계에 기초를 마련하였다. |
원문URL | http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART65395885 |
첨부파일 |
과학기술표준분류 | |
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ICT 기술분류 | |
DDC 분류 | |
주제어 (키워드) | Streptococcus pneumoniae,glycerol dehydrogenase,expression and purification,identification of initial function,crystal screen,폐렴 연쇄상구균,글리세롤 탈수소 효소,단백질 발현 정화,효소 활성 식별,단백질 결정 성장 |