Expression,Purification and Bioactivity Identification of Recombinant Human Leukemia Inhibitory Factor(hLIF) Fusion Protein
기관명 | NDSL |
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저널명 | 中國生物工程雜誌 = Journal of Chinese biotechnology |
ISSN | 1671-8135, |
ISBN |
저자(한글) | SUN, Jing,WANG, Bin,DUAN, Zhi-qing,HU, Ning-zhu,LI, Jian-fang,LI, Yan-han,HU, Yun-zhang |
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저자(영문) | |
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소속기관(영문) | |
출판인 | |
간행물 번호 | |
발행연도 | 2013-01-01 |
초록 | 목적 : 재조합 hLIF 융합단백질에 대해 원핵발현, 유도발현, 정화 및 활성검증을 진행한다. 기법 : hLIF 유전자를 pThioHisA 벡터에 클로닝 하여 융합발현 벡터 pThioHisA-hLIF를 구축한 다음 대장균 BL21(DE3)을 형질전환 하고 IPTG 유도발현 한다. 발현산물을 친화성 크로마토그래피 한 다음 Western blot으로 목적 단백질의 특이성을 검측한다. 마우스 배아 줄기세포 탈 배양보조세포층 배양으로 정화후의 재조합 hLIF 융합단백질에 대해 생물학적 활성의 검증을 한다. 결과 : 유도온도의 낮춤과 유도시간의 연장은 hLIF 융합단백질의 가용성 발현을 증가시킬 수 있다. 정화후의 재조합 단백질 순도는 95% 이상이고 Western blot 검측 결과 양호한 특이성이 있다는 것을 증명하였다. 탈 배양보조세포층 세포배양의 조건에서 정화한 hLIF 융합 단백질의 첨가는 마우스 배아 줄기세포의 미분화 상태를 효율적으로 유지할 수 있다. 결론 : 재조합 hLIF 융합단백질은 대장균에서 고효율적인 발현을 할 수 있고 양호한 특이성을 갖고 있다. 이는 줄기세포 연구 및 hLIF 단백질의 기타기능 연구에 있어서 기초를 마련해 주었다. |
원문URL | http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART69976063 |
첨부파일 |
과학기술표준분류 | |
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ICT 기술분류 | |
DDC 분류 | |
주제어 (키워드) | Recombinant hLIF fusion protein,Prokaryotic expression,Purification,Mouse embryonic stem cells,Bioactivity identification,재조합 LIF 융합단백질,원핵발현,정화,마우스 배아 줄기세포,생물학적 활성 검증 |