저자(한글) |
LIU, Haiying,LIU, Lianwei,JIANG, Yusheng,SUI, Youzhen,CHEN, Lei |
초록 |
갯가재(Oratosquilla oratoria)는 해만 저인망 어업에서 중요한 경제 가치를 갖고 있는 어종이며 세계에 광범위하게 분포되어 있다. 갯가재 자원은 날따라 감소하고 있다. 인공 육묘기술에서 성공을 거둔 후, 갯가재 양식 과정에 존재하는 병해 문제 및 병해 방지 문제가 두드러지고 있다. 본 논문에서는 분자 생물학 수단을 통하여 갯가재의 면역계 핵심 효소-프로페놀옥시다아제(prophenoloxidase, proPO)의 분자 구조 및 유전자의 조직 발현 상황을 연구하였으며, 분자 수준에서 면역 메커니즘을 심층적으로 연구하였다. RT-PCR(real time-polymerase chain reaction) 기법과 RACE(rapid amplification of cDNA endsc) 기술을 이용하여 갯가재 혈액세포 중 프로페놀옥시다아제(O-proPO) 유전자를 클로닝하였다. 해당 유전자의 cDNA 전체길이는 2436bp, ORF(open reading frame)는 2142bp였으며, 아미노산을 713개 인코딩하였다. 예측한 분자량은 82446Da, 등전점(isoelectric point)은 8.78였다. 해당 유전자는 Genbank에 등록된 Penaeus monodon, 흰다리새우(Litopenaeus vannamei), 담수산새우(Macrobrachium rosenbergii), Penaeus semisulcatus, Marsupenaeus japonicas의 proPO 유전자 서열과 비교적 높은 동원성(유사성)을 나타냈으며 그 퍼센트수는 각각 82%, 76%, 76%, 72%, 70%였다. 서열 분석 결과, O-proPO는 proPO 패밀리의 성원이었으며 그 아미노산 서열에는 여러 개의 면역 조절 좌위(loci)가 들어있었다. 계통진화(phyletic evolution) 분석 결과, O-proPO와 십각목(Decapoda)의 proPO는 한가지 부류의 2개 소집단(subgroup)에 속하였으나, 그 후 풍년새우(fairy shrimp)의 proPO와 한 부류로 되었다. O-proPO 유전자 발현은 조직 특이성을 갖고 있었으며, 혈림프(hemolymph)와 장 내에서 모두 발현하였으며, 혈림프에서의 발현량이 장에서의 발현량보다 높았다. |