| 저자(한글) |
TIAN, Wen-hong,HU, Jian-yang,DONG, Xiao-yan,LI, Ming-hao,WU, Xiao-bing |
| 초록 |
목적 : 바이오센서로 마우스(mouse) 간장속 microRNA(miRNA) 활성을 검측하는 방법으로 miR-21가 정상 마우스 간장속에서의 활성을 측정한다. 기법 : 우선 분자클로닝의 방법으로 miRNA 활성을 검측하는 일반형 플래스미드센서 D sensor를 구축한다. 각 가지별 miRNA의 상보적 서열을 D sensor속에 삽입하여 상응한 miRNA 활성검측 센서를 구축한다. 수력학적 방법으로 miR-21을 검측하는 D sensor를 정상 마우스 체내에 주입, miR-122 D sensor를 양성 대조로, miR-206 D sensor를 음성 대조로, miRNA 상보적 서열을 삽입하지 않은 D sensor를 블랭크(blank control)로 한다. 서로 다른 시간에 미정맥에서 혈액채취하여 Gluc 발현을 측정, 죽은 마우스 간장에서 Fluc발현을 측정, 비교계산하여 miRNA 활성을 얻는다. 마지막으로 QRT-PCR 방법으로 마우스 간장조직 속의 miR-21, miR-122 및 miR-206 발현수준을 측정한다. 결과 : RIF(Relativeinhibiting fold)치로 miRNA 활성을 표시하면 miR-21, miR-122 및 miR-206의 활성은 각각 80.03±21.25,29.90±5.90 및 0.92±0.29이다. 이는 마우스 정상 간장속 miR-21의 음성조절 활성은 miR-122보다 현저하게 높다. 하지만 QRT-PCR법으로 측정결과 miR-21의 발현수준은 miR-122보다 현저하게 낮고 또한 miR-206은 거의 발현하지 않았다. miR-21 및 miR-122의 활성 및 발현수준 비교결과 miR-21의 발현수준은 실제적으로 그 활성을 반영하지 못했다. 결론 : 마우스 간장속의 miRNA 활성 검측방법을 성공적으로 구축하였다. 또한 제일 처음으로 마우스 정상 간장속의 miR-21 활성수준이 miR-122보다 높지만 발현 수준은 miR-122보다 낮다는 것을 발견하였다. miR-21이 간장의 정상적인 생리기능을 유지하는데 대한 중요한 작용을 제시하였고 또한 조절한 목적 유전자와 메커니즘을 연구할 가치가 있다는 것을 제시하였다. |
