| 저자(한글) |
WANG, Di,LU, Fu-ping,WANG, Hai-jun,LI, De-mao,CHEN, Shu-lin,ZHANG, Ke |
| 초록 |
본 논문은 도코사헥사엔산(docosahexaenoic acid, DHA)을 생산하는 시조카이트륨(Schizochxtrium) B4D1과 검정곰팡이(Aspergillus niger) CGMCC 3.316를 초기 균주(original strains)로 하고, 원형질체 융합 기술(protoplast fusion technology)로 전분을 발효하여 DHA를 생산할 수 있는 신형(new type) 시조카이트륨을 선발하여 육종하였다. 분해 효소(lysing enzyme)를 이용하여 2개 교배 모본의 원형질체를 제조하였으며, 또한 2개 교배 모본의 배양 시간, 배양 방법, 효소 분해 시간 등 조건이 원형질체의 생산량에 미치는 영향을 연구한 기초에서 폴리에틸렌글리콜(polyethylene glycol, PEG)의 유도 작용으로 원형질체를 융합하였다. 마지막으로 원형질체 융합 최적 조건을 확정하였는데 그 최적 조건은 40%의 PEG6000, 융합 온도 30℃, 융합 시간 10분이었으며, 해당 조건에서 융합율이 1.9%에 도달할 수 있었다. 균락(colony)의 모양, 색상, 형태에 대한 비교 그리고 분리 배양 과정으로 선별을 진행하여 전분을 이용할 수 있는1주(strain)의 시조카이트륨 융합체(fusant)를 획득하였다. RAPD 검증 결과, B4D1과 CGMCC 3.316는 재조합 되었으며, 융합 균주는 B4D1에서 근원한 유전 정보(genetic information)를 더욱 많이 발현하였다. |
