저자(한글) |
PENG, Chao,ZHANG, Rong-Hu,GAO, Bing-Miao,ZHANG, SUN,ZHANG, Ben,LUO, Su-Lan |
초록 |
PDI(protein disulfide isomerase)는 소포체의 초기 펩티드사슬(peptide chain) 접힘에서 주요한 역할을 하는 접힘효소(folding enzyme)이다. 열대 약용 해양생물인 Conus snails의 독액에는 PDI 효소가 대량으로 들어있는데, PDI 효소는 독액 내 코노톡신 신경펩티드의 체내 산화 접힘(oxidative folding)에 큰 작용을 한다. 샘플 부하량(loading quantity of sample), 수화(Hydration) 방식과 시간, 탈염 절차, 집중 전압과 시간, 평형시간, 겔 전기영동법과 염색법 등을 최적화하여 Conus snails의 독액 단백질 샘플을 얻고, 이상적인 2차원 전기영동 실험조건과 방법을 구축하였다. 2차원 전기영동과 MALDI-TOF-MS 질량 분석기술을 적용하여, 하이난(海南)산 Conus betulinus Linnaeus의 독액 단백질에서 PDI 등 9가지 단백질을 성공적으로 분리하였다. 또 2차원 전기영동과 PDQuest 스프트웨어를 적용하여 3종류의 크기가 서로 다른 Conus betulinus Linnaeus의 독액 중 총 단백질의 차이점을 비교 분석하고, 질량분석을 적용하여 뚜렷한 차이가 있는 단백질 반점(protein spot)을 감정하였다. 본 연구에서는 Conus betulinus Linnaeus 독액 2차원 전기영동 분석 및 질량 감정 기술방법을 구축하였다. 이는 이후 천연 Conus snails PDI 효소의 대량 분리와 순화에 기초를 마련할 뿐만 아니라 단백질체학 기술방법을 이용한 Conus snails 독액 특성 연구에도 큰 도움이 될 것이다. |