초록 |
피넨은 중요한 플랫폼 화합물로써 고밀도 연료, 정밀화학품 및 재료를 합성하는데 이용할 수 있다. 본 논문에서는 개똥쑥 유래의 β-피넨 신테이즈 유전자와 이종 교잡의 메발론산염(heterologous hybrid mevalonate, MVA) 경로를 동시에 BL21(DE3) 내에 접합시킨 다음, 가스 크로마토그라피법(gas chromatography, GC) 및 가스 크로마토그라피 질량 분석법(GC-mass spectrometry, GC-MS)을 통하여 발효 산물을 정성적 및 정량적으로 검사하였다. 그리고 발효 조건의 최적화를 통하여 β-피넨의 발효생산에 영향을 미치는 요인(즉 유도 온도, 유도제 농도 및 질소원 등)을 고찰하였다. 그 결과, 개똥쑥으로부터 추출한 피넨 신테이즈는 숙주 세포 내에서 효율적으로 발현되었으며 또한 β-피넨의 합성을 효율적으로 촉진할 수 있었다. 재조합균의 발효 조건에 대한 최적화를 통하여 최적의 배양 조건을 확보하였다. 즉, 유도 온도가 28℃이고 IPTG 농도가 0.1mmol/L이며 MD 쇠고기 엑기스 분말을 최적의 유기 질소원으로 사용하는 것 등이다. 최적의 배양 조건에서 β-피넨의 생성량은 22.89mg/L에 도달하였으며 최적화하기 전(4.60mg/L)보다 3.98배 향상되었다. |