저자(한글) |
WANG, Di,NI, Hui,LI, Lijun,CHEN, Feng,XIAO, Anfeng,CAI, Huinong,SU, Wenjin |
초록 |
[목적] 새로 분리한 하나의 나린기나아제(naringinase) 생성 균주 JMUdb058을 감정하고, 해당 균주의 나린기나아제 합성 법칙을 연구하는 것이다. [기법] 형태학적 관찰, 28S rDNA 서열 분석을 이용하여 Mudb058을 감정하고; 역상 고성능 액체 크로마토그래피(reversed phase High Performance Liquid Chromatography)로 나린진(naringin)에 대한 Mudb058 조효소액의 가수분해 작용을 측정하고 나린기나아제(Naringinase) 활성을 감정하였다. 또 11가지의 탄소원과 6가지 질소원으로 셰이크 플라스크 발효(shaking flask fermentation)를 진행하고, 탄소원과 질소원이 해당 균주의 나린기나아제 분비에 미치는 영향을 연구하였다. 그리고 고체 및 액체 조건에서 발효를 진행하여 해당 균주의 나린기나아제 합성 능력을 측정하였다. [결과] 균주 JMUdb058의 균락 형태와 미세 구조 형태는 누룩곰팡이속의 전형적인 형태 특성에 부합되며, 그 28S rDNA 서열과 아스퍼질러스 아큘레아투스(Aspergillus aculeatus)와의 유사성은 100%에 도달하였다. 또 액상과 고체 상태 두 가지 발효법으로 얻은 조효소액은 표준 용액 중의 나린진을 가수분해하여 프루닌(prunin)과 나린게닌(naringenin)을 얻었으며, 감귤류 즙(citrus juice) 중의 나린진을 가수분해할 수 있었다. 헤스페리딘(hesperidin), 나린진, 루틴(rutin)과 람노오스(rhamnose)를 탄소원으로 하고, 트리프톤(tryptone)과 콩가루(soybean meal) 등 유기물을 질소원으로 하여 나린기나아제를 분비할 수 있었다. 해당 균주는 고체 상태로 발효할 때 비교적 강한 나린기나아제 발효 능력을 가졌으며, HPLC법으로 측정한 alpha;-L-람노시다아제 활성과 나린기나아제 활성은 각각 5903과 1939U/gds였으며, Davis법으로 측정한 나린기나아제 활성은 72232U/gds였다. [결론] 본 연구에서는 최초로 아스퍼질러스 아큘레아투스가 나린기나아제를 분비할 수 있다는 것을 발견하였으며, 람노오스를 기초로 한 물질은 그 나린기나아제의 유도물이 될 수 있었다. 아스퍼질러스 아큘레아투스 JMUdb058의 고체 발효를 거친 나린기나아제의 생성 능력은 아주 우수하였으며, 고(high)함량의 나린기나아제를 생성할 수 있는 새로운 미생물 자원이다. |