| 저자(한글) |
GUO, Ping,WU, Yao,LI, Jia,FANG, Rong-xiang,JIA, Yan-tao |
| 초록 |
형질전환 방법과 비교했을 때, 유전자의 일시적인 발현(transient expression) 시스템은 신속하고 간편한 특징이 있다. 벼의 miRNA와 표적 유전자 간의 제어 관계를 점검하기 위해, MIRNA 유전자와 GFP/표적 서열의 융합 유전자(혹은 GFP/표적 돌연변이 서열의 융합 유전자)를 같은 일과성 발현 벡터에 구축하고, 벼 원형질체(rice protoplast)를 형질전환하였다. 그리고 GFP/표적 서열의 융합 유전자와 GFP/표적 돌연변이 서열의 융합 유전자를 함유한 벡터 간의 형광 강도 차이를 관찰하고, qRT-PCR 방법을 이용한 표적과 비표적 mRNA의 수준 차이를 검측함으로써, 표적 유전자에 대한 miRNA의 제어 과정을 검증하였다. osaMIR156과 osaMIR397 및 표적 서열을 사용하여 실험 설계 방법을 검증하고, 형광 현미경 관찰과 qRT-PCR 검측을 통하여, osamiR156과 osamiR397으로 인해 대응되는 표적 서열에 있는 GFP 융합 유전자의 전사물 수준과 GFP 형광 수준이 감소한다는 것을 증명하였다. 이 유형의 벼 원형질체에 대한 일과성 발현 방법은 대규모적인 체내 miRNA의 표적 유전자 검측에 활용할 수 있다. 기타 근연종 단자엽식물의 RNA 가공 시스템과 벼의 RNA 가공 시스템이 비슷하므로, 기타 단자엽식물의 miRNA 기능을 연구하는 과정에서도 매우 양호한 응용 전망을 보이고 있다. |
