| 초록 |
PCR 기술을 이용하여 무스카리(Muscari armeniacum) '아르메니아(Armenia)'로부터 하나의 플라보놀 합성효소(flavonol synthase, FLS) 유전자를 복제하였으며 MaFLS로 명명하였다. MaFLS의 cDNA 전체길이는 1,076 bp, 개방해독틀은 999 bp이며, 332개 아미노산을 코딩하고, 추측한 단백질 분자량은 38.51 kD, 이론 등전점은 5.09이다. 상동성 비교와 계통진화 분석 결과, MaFLS 유전자가 코딩한 아미노산은 플라보놀 합성효소의 전형적인 2-ODD 슈퍼패밀리 보존 도메인을 갖고 있었으며, 애기장대(Arabidopsis thaliana)와 수수 FLS와의 일치성은 각각 60%와 83%였다. 반정량 PCR과 형광 실시간 정량 PCR 발현 분석결과, MaFLS는 꽃기관에서 과발현되며, 뿌리, 줄기, 잎에서 미세하게 발현된다. 완전히 착색되지 않은 출뢰기부터 발현되기 시작하여 꽃이 완전히 피었으나 착색되지 않을 시기에 최고값에 도달하였으며, 그후부터 꽃 발달 발현량에 따라 점점 감소하였다. 원핵 발현에 의해, 1개의 약 38 kD인 외래단백질(foreign protein)을 검출하였으며 예측한 단백질 분자량과 일치하였다. 해당 연구결과는 플라보놀 합성에 대한 무스카리 MaFLS 유전자의 조절 작용을 탐구하는데 기초를 마련하였다. |
