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논문 기본정보
Expression,Crystallization and Substrate Binding Studies of Human Histone N-terminal Acetyltransferase Nat11
논문 개요
| 기관명 | NDSL |
|---|---|
| 저널명 | 生物技術通報 = Biotechnology bulletin |
| ISSN | 1002-5464, |
| ISBN |
논문저자 및 소속기관 정보
| 저자(한글) | HUANG, Jia-xin,LI, Hai-tao |
|---|---|
| 저자(영문) | |
| 소속기관 | |
| 소속기관(영문) | |
| 출판인 | |
| 간행물 번호 | |
| 발행연도 | 2014-01-01 |
| 초록 | α-아미노산아세틸기전달효소 11(alpha-amino acetyltransferase 11, Nat11)의 촉매 작용으로 히스톤 H4와 H2A 아미노 말단(amino terminal)을 아세틸화 수식(acetylation modification)하는 조건에서 중요한 후성 유전학적 조절(epigenetic regulation) 기능이 있다. 본 논문은 인간 Nat11 유전자를 원핵 발현 벡터 pSUMO에 구축한 후 대장균 BL21(DE3)에 전환하여 재조합 발현을 진행하였다. 니켈 컬럼 친화성 크로마토그래피(nickel column affinity chromatography) 등 일련의 생체외 정제 단계를 통하여 고순도(highly purified) Nat11을 획득하였다. 등온 적정 열량측정법(isothermal titration calorimetry, ITC)으로 Nat11과 기질 폴리펩타이드(polypeptide)의 마이크로몰 차수를 갖는(micro molar order) 결합 상수를 측정하였다. 질량 스펙트럼 분석(mass spectrometry analysis) 결과, 정제한 Nat11과 결합된 대장균 내인성 유래 아세틸조효소 A(acetyl coenzyme A) 혹은 조효소 A(coenzyme A)는 ITC로 적정하는 과정에서 폴리펩타이드 기질에 대하여 아세틸화 수식을 진행할 수 있었다. 이것은 정제하여 얻은 Nat11은 용액에서 효소 활성이 있다는 것을 설명한다. Nat11의 결정 성장(crystallization)에 대하여 연구한 결과, 초기 선별 최적화를 통하여 단백질 절단체 및 기질-효소 결합(substrate-enzyme binding) 단백질 단결정을 얻을 수 있었다. |
| 원문URL | http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART75842000 |
| 첨부파일 |
추가정보
| 과학기술표준분류 | |
|---|---|
| ICT 기술분류 | |
| DDC 분류 | |
| 주제어 (키워드) | Alpha-amino acetyltransferase 11,Recombinant protein expression,Protein aggregation,Enzyme-substrate binding,Crystallization,α-아미노산아세틸기전달효소 11,재조합 단백질 발현,단백질 응집,효소-기질 결합,결정 성장 |