| 저자(한글) |
GUO, Hui-li,LUO, Zai-qi,YANG, Ya-dong,YANG, Ming-feng,LV, He-shu,LIU, Chun-mei,YANG, Jing,WANG, You-nian,MA, Lan-qing |
| 초록 |
레스베라트롤(Resveratrol)은 천연식물 보조효소로서 특수한 약리 기능과 보건 기능이 있다. 스틸벤 합성효소(Stilbene synthase, STS)는 이 화합물 합성의 관건 효소이며 율속효소(rate limiting enzyme)이다. 레스베라트롤은 특정된 몇가지 식물에만 존재하며 함량 차이도 크다. 호장근(Polygonum cuspidatum)에서 레스베라트롤의 함량은 포도, 땅콩에서의 함량보다 1,000배 이상 크다. 서로 다른 STS의 촉매 능력이 레스베라트롤의 함량 차이를 초래하는 원인 중 하나라는 것을 추측할 수 있다. 상술한 추측을 검증하기 위해, 본 논문은 overlap PCR 기술을 통하여 포도잎의 게놈 DNA에서 포도의 STS 유전자를 복제하여 얻었다. 그리고 기존에 얻은 호장근의 유전자(PcPKS5)에 대한 원핵발현 분석을 수행하였다. 유도 발현 산물에 대하여 Ni 2+ 친화성 칼럼을 이용한 정제 과정과 PD-10 칼럼을 이용한 탈염 과정을 수행한 후, 분자량이 약 43kDa인 가용성의 정제 단백질을 얻었다. 효소 촉매 산물의 분석 결과, 두 종 효소의 촉매 산물이 모두 레스베라트롤이었다. 효소 동역학 분석 결과, 호장근의 STS 촉매 효율(K cat /K m )은 포도의 STS 촉매 효율의 2.4배였다. 본 논문은 식물 유형 Ⅲ인 Polyketide synthase(PKS) 슈퍼패밀리의 촉매 활성 위치와 보수적 위치점(Conservative site)의 각도로부터 상술한 차이를 생성할 수 있는 원인을 분석하였다. |
