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논문 기본정보
Expression of ns1 gene from Bombyx mori bidensovirus by a novel Baculovirus expression system
논문 개요
| 기관명 | NDSL |
|---|---|
| 저널명 | 生物工程學報 = Chinese journal of biotechnology |
| ISSN | 1000-3061, |
| ISBN |
논문저자 및 소속기관 정보
| 저자(한글) | LI, Guo-hui,WANG, Peng,LI, Mang-mang,XU, Wu,HU, Chao-yang,YAO, Qin |
|---|---|
| 저자(영문) | |
| 소속기관 | |
| 소속기관(영문) | |
| 출판인 | |
| 간행물 번호 | |
| 발행연도 | 2014-01-01 |
| 초록 | 재조합 베큘로바이러스(recombinant baculovirus)로 곤충 세포를 감염시키는 것은 외인성 단백질을 발현하는데 가장 흔히 사용하는 방법이다. 형질전화 세포 내에서 재조합 바이러스 입자가 형성되었는지를 효과적으로 감정하기 위하여 pFastBacI 플라스미드를 개조하고 전초기유전자(Immediate early gene) ie1 프로모터(Promoter)로 조절하는 녹색 형광 단백질의 egfp 유전자 발현 카세트(target gene cassette) 및 폴리헤드린 유전자 프로모터(Polyhedrin gene promoter)로 조절하는 외인성 DNA의 일반적 이중 발현 벡터를 구축하였다. 효소 절단, 연결 방법을 통하여 누에나방(Bombyx mori) bidensovirus에서의 ns1 유전자를 폴리헤드린 프로모터 하류에 연결하였다. 전이효소(Transposase)의 유도를 통하여 공여체 플라스미드(Donor plasmid) 윗부분 서열을 셔틀 벡터(shuttle vector)에 유도하였으며 egfp와 ns1 유전자를 동시에 발현할 수 있는 재조합 bacmid를 구축하였다. 구축한 재조합 bacmid DNA로 BmN 세포를 형질전환하고 시각화(Visualization) 녹색 형광 신호를 관찰하는 것을 통하여 형질전환 후의 세포 내 재조합 바이러스 입자의 형성 상황을 빠르게 관찰할 수 있으며 형질전환 한 후의 세포 상청액을 수집하였다. 해당 상청액으로 BmN 세포를 감염시키고 감염 4일 후의 세포 총 단백질에 대해 Western blotting 분석을 진행하였다. 연구 결과에 의하면 36 kDa 크기의 특이성 단백질을 교잡하여 얻을 수 있으며 이는 NS1 단백질이 성공적으로 발현되었다는것을 말한다. 이상의 연구 결과는 ns1 유전자의 기능을 심층적으로 연구하는데 기반을 마련하였다. |
| 원문URL | http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART70436841 |
| 첨부파일 |
추가정보
| 과학기술표준분류 | |
|---|---|
| ICT 기술분류 | |
| DDC 분류 | |
| 주제어 (키워드) | Baculovirus,gene expression,Bombyx mori bidensovirus,non-structural protein NS1,베큘로바이러스,유전자 발현,누에나방 Bidensovirus,비구조 단백질 NS1 |