Establishment of cell surface display system based on N-domain of ice nucleation protein of Xanthomonas
기관명 | NDSL |
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저널명 | 應用與環境生物學報 = Chinese journal of applied and environmental biology |
ISSN | 1006-687x, |
ISBN |
저자(한글) | FU, Wei,LI, You-guo,LI, Yi-xing |
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저자(영문) | |
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출판인 | |
간행물 번호 | |
발행연도 | 2014-01-01 |
초록 | 자주적이고 고효율적인 세균 표면 발현 시스템(bacterial surface display system)을 구축하기 위해 야생 청경채 크산토모나스 캠페스트리스균(Xanthomonas campestris) 빙핵활성 단백질(ice nucleation protein)의 N 도메인을 이용하여 바실러스 푸밀러스(Bacillus pumilus) 지방 분해효소를 대장균 Rosetta 2(DE3) 표면에서 발현시켰다. 세포 분획, 지방 분해효소 활성 측정, His-tag In-gel stain 분석 등 방법을 사용하여 재조합 단백질의 발현을 검사하였고 더 나아가 서로 다른 기질, 온도, pH, 유기용제(organic solvent)가 효소 활성 안정성에 미치는 영향을 분석하였다. 연구 결과 융합 단백질은 대장균 세포 외막에서 성공적으로 발현하였다. 재조합 지방 분해효소 활성은 동결건조 세포(lyophilized cell) 기준으로 (74.6±4.5)U/g이었고 매개 세포 표면에서 발현한 지방 분해효소 분자의 수량은 19,267개였다. 발현된 효소는 중쇄 및 장쇄 지방산 에스테르에 높은 가수분해 활성을 보였다. 최적 pH는 11.0, 최적 온도는 40℃였으며 40℃ 조건에서 일주일이 지나서도 여전히 80% 효소 활성을 유지하였다. 본 연구는 야생 청경채 크산토모나스 캠페스트리스균 빙핵활성 단백질 N 도메인을 기반으로 한 발현 시스템은 고효율적이고 안정적인 세균 표면 발현 시스템이라는 것을 입증하였다. |
원문URL | http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART70689466 |
첨부파일 |
과학기술표준분류 | |
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ICT 기술분류 | |
DDC 분류 | |
주제어 (키워드) | Xanthomonas campestris,ice nucleation protein,bacterial surface display,lipase,Escherichia coli,야생 청경채 크산토모나스 캠페스트리스균,빙핵활성 단백질,세균 표면 발현,지방 분해효소,대장균 |