| 저자(한글) |
HUANG, Jun,CHEN, Su-juan,HUANG, Kai,YANG, Lin,WU, Bai,PENG, Da-xin |
| 초록 |
【목적】살모넬라 풀로룸(Salmonella pullorum) 유전자의 발현과 결실 균주의 생물학적 특성을 측정하여 그 생물막 형성과 관련되는 σ인자를 감정하고자 한다. 【방법】크리스탈 바이오렛 염색(crystal violet staining) 정량법을 이용하여 살모넬라균의 생물막 형성 능력을 측정하였다. 카탈라아제 시험을 통하여 rpoS의 활성을 측정하고 rpoS 유전자 의존형 및 비의존형 생물막 형성 균주를 확인하였다. 구축된 형광 정량 PCR기법을 이용하여 지수기(exponential phase)와 생물막 형성기에 rpoS 유전자 비의존형 균주 내 6개 σ인자의 유전자 발현 차이를 비교하였다. Red 상동 재조합 시스템을 이용하여 감정 대상 σ인자의 유전자 결실 균주를 구축하였으며, 환경 스트레스에 대한 야생 균주와 유전자 결실 균주의 저항성 차이를 측정하였다. 【결과】살모넬라 풀로룸 S6702는 생물막을 형성할 수 있었으며, 카탈라아제 시험에서 음성으로 나타났다. 이로부터 S6702가 rpoS 유전자 비의존형 생물막 형성 균주임을 확인하였다. 형광 정량 PCR검사 결과, 4-24시간 배양한 후, S6702 내 rpoE 유전자의 발현량이 가장 높았다. 야생 균주에 비해, ΔrpoS 결실 균주는 생물막 형성 능력을 보존하였으나, ΔrpoE 결실 균주는 생물막을 형성할 수 없었다. 환경 스트레스에 대한 rpoS과 rpoE 유전자 결실 균주의 저항성은 뚜렷하게 저하되었다. 【결론】rpoS 유전자 비의존형 생물막 형성 균주의 rpoE 유전자는 생물막 형성을 조절하는 σ인자 가운데 하나에 속하였는데, 해당 발견은 살모넬라균 생물막 형성의 조절 메커니즘을 한층 더 연구하는데 이용할 수 있다. |
