| 저자(한글) |
FAN, Yi-xuan,ZHANG, Yan-li,WANG, Qiang,REN, Cai-fang,WANG, Feng |
| 초록 |
샤오메이산 돼지(Xiao Meishan swines) 골수 중간엽 줄기세포(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)에서 코넥신(connexin) 43 유전자(Cx43)를 과발현 시켜 Cx43이 샤오메이산 돼지 BMSCs의 증식 및 사멸에 미치는 영향을 탐구함으로써, 전이유전자 동물 모델의 구축에 기반을 마련하였다. 분자 기술을 이용하여 Cx43 진핵 발현 벡터 pEGFP-Cx43를 구축하고, Nucleofector TM 기법으로 P3대 BMSCs를 형질전환하였다. 세포의 형질전환 효율을 검사하고 RT-PCR, 면역형광과 Western blotting 기법으로 Cx43의 발현을 감정하였으며, 유세포분석기술로 BMSCs의 증식 능력과 사멸 상황을 분석하였다. 효소 절단 감정과 서열 검사를 통하여 pEGFP-Cx43 진핵 발현 벡터를 구축하는데 성공했다. BMSCs 형질전환 후 EGFP의 양성 세포가 약 60% 차지하였다. 전이유전자 BMSCs 가운데서 Cx43 단백질의 발현 수준이 많이 증가하였고, 세포 증식 능력이 뚜렷하게 향상하였으며 사멸률이 선명하게 감소하였다. 실험 결과, 샤오메이산 돼지 BMSCs 내 Cx43 과발현은 세포 증식을 촉진하는 한편, 그의 사멸을 억제한다. 이 연구 결과는 다음 단계의 연구에 기반이 된다. |
