| 초록 |
한국산 살모사(Agkistrodon halys)의 독으로부터 phosphodiesterase(EC 3.1.4.1)를 순수 하게 정제하였다. 5'-AMP 친화성 크로마토그라피를 포함하는 네 단계의 분리과정을 거쳐 3,600배 정제한 phosphodiesterase의 비활성도는 81.2 units/mg이었다. 정제된 효소는 monomer 구조의 당단백질로서 그 분자량이 110,000으로 확인되었다. 이 효소의 $K_m$ 과 $V_{max}$ 는 각각 $2.44{ times}10^{-3}M$ , $4.5{ times}10^{-4}moles/l{ cdot}min$ 으로 측정되었고 bis-p-nitrophenyl phosphate의 가수분해를 촉매하는 활성화에너지는 10.4 KJ/mole이며 효소활성에 대한 최적 pH는 9.5로 나타났다. 순수하게 정제된 효소를 이용하여 plasmid DNA를 기질로 사용함으로써 phosphodiesterase의 exonuclease 및 endonuclease 활성을 모두 확인하였다. 따라서 한국산 뱀독의 phosphodiesterase는 exonuclease 활성은 물론 endonuclease 기능도 함께 보유하고 있는 이중성 효소임을 증명하였다. |
